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莊盟生物

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產(chǎn)品名稱:K1快克隆感受態(tài)細(xì)胞(ZC113) 促銷截止日2025-05-31

貨號 規(guī)格 價格 促銷價 訂購數(shù)量 是否現(xiàn)貨
ZC113-2 100μl×20 360 360 - + 有貨
ZC113-3 100μl×100 1200 600 - + 有貨

產(chǎn)品介紹:

本公司生產(chǎn)的K1克隆感受態(tài)細(xì)胞源于優(yōu)選的Turbo菌株。該菌株是經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化,使用pUC19質(zhì)粒檢測,轉(zhuǎn)化效率可達1×109cfu/μg DNA。K1克隆感受態(tài)細(xì)胞中突變的ΔlacZM15基因產(chǎn)物與載體攜帶的β-半乳糖苷酶基因表達產(chǎn)物實現(xiàn)α互補,加入lacIq基因更嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目刂?/span>Lac啟動子的開啟,從而極大的降低了藍(lán)白斑篩選中的假陽性率。此外,K1克隆感受態(tài)細(xì)胞中endA1的突變有利于克隆DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取,且質(zhì)粒得率要高于其他常用克隆菌株。本菌株具有T1噬菌體抗性(fhuA2)。

基因型為:F' proA+B+ lacIq ΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB) glnV galK16 galE15 R(zgb-210::Tn10)TetS endA1 thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5


產(chǎn)品特點:

1、轉(zhuǎn)化效率可達1X109

2、質(zhì)粒提取得率比DH5a高20%

3、6小時見斑

4、10分鐘完成感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化(氨芐抗性質(zhì)粒)



實驗數(shù)據(jù):

1.K1和DH5α轉(zhuǎn)化連接產(chǎn)物對比:

分別使用K1和DH5α進行連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化,在6h左右,K1可見斑,7小時后可挑單克隆進行菌落pcr。

對比圖如下:





2.K1和DH5α提質(zhì)粒對比


跑膠結(jié)果如下:


挑取單斑下提取質(zhì)粒圖:1-6分別為7h的DH5α,7h的K1,8h的DH5α,8h的K1,過夜的含氨芐抗性質(zhì)粒的DH5α,K1。

實驗結(jié)果如下:

單克隆菌落搖菌時間

K1 Od600

質(zhì)粒濃度ng/μl

DH5α Od600

質(zhì)粒濃度ng/μl

7h

4.8

314.1

4.28

282.6

8h

5.4

356.5

4.8

290.0

過夜

5.58

559.3

4.94

464.3


感受態(tài)快轉(zhuǎn)方法:

10min 快速轉(zhuǎn)化方案(適用范圍:氨芐抗性質(zhì)粒)

1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中(解凍1-2分鐘),加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物),輕輕混勻,在冰浴中放置5分鐘。

2.將離心管置于42℃水浴中放置60秒,然后快速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,使細(xì)胞冷卻2-3分鐘,該過程不要搖動離心管。

3.吸取全部感受態(tài)細(xì)胞加到含Amp抗生素的 LB 固體瓊脂培養(yǎng)基上,將感受態(tài)均勻涂開。

4.倒置平板,37°C培養(yǎng) 12-16小時。




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